Práctica 23: Estudio microscópico de principios inmediatos en heces

Estudio microscópico de principios inmediatos en heces

Objetivo

El objetivo de la práctica es realizar un examen microscópico de las heces y además añadirle varios elementos para poder ver las diferencias

Fundamento

En las heces podemos observar con facilidad el grado de digestión de los distintos principios inmediatos, de modo que este examen microscópico es de gran ayuda en el diagnóstico de los distintos tipos de patologías relacionadas con el proceso de la digestión. 

Significado clínico

La investigación de los principios inmediatos que aparecen digeridos en las heces debe realizarse a nivel macroscópico y microscópico. 

En una primera etapa, se realiza un análisis a simple vista de las heces, extendiendo una porción de la muestra sobre una placa petri y observando su consistencia, color, olor y forma. Buscamos también trozos de carne, fragmentos de fécula, grasas neutras, moco, pus y sangre que puedan darnos alguna indicación de anormalidad en la digestión. Es importante tener en cuenta la existencia de elementos que pueden entorpecer este análisis, como es la presencia de artefactos o restos alimenticios difícilmente digeribles. 

Para un correcto análisis, es conveniente que el paciente siga una dieta normal, pero indicándole que debe contener todos los principios inmediatos: grasas, proteínas e hidratos de carbono. Esto lo hará como mínimo durante 2-3 días seguidos y la muestra se recogerá el último día.

Materiales

• Tubos falcon

• Portaobjetos

• Cubreobjetos

• Pipetas pasteur

Muestra

• Heces

Reactivos

• Aceite

• Harina

• Colorante lugol

• Colorante Sudan III

• Agua destilada

Aparataje

• Vortex

Procedimiento

1. Preparamos los reactivos:

- Colorante lugol: Hacemos una dilución 1/3 con agua destilada (1 parte de lugol y 2 partes de agua)

- Solución alcohólica de Sudán III: Mezclamos 0,5 gramos Sudán III + 45 mL de etanol 96ºC y calentamos suavemente y dejamos enfriar y filtramos.

2. En un tubo falcon echamos 10 mL de agua destilada 

3. Añadimos una parte de heces del tamaño de un guisante

4. Agitamos en el vortex hasta que la muestra quede disuelta

5. Repartimos la muestra en varios tubos:

- A un tubo le añadimos una gotas de aceite y mezclamos

- A otro tubo le añadimos un poco de harina y mezclamos

6. Tomamos una gota de la muestra que no ha sido alterada y la depositamos en un portaobjetos y ponemos un cubre. 

7. Tomamos unas gotas de la muestra que ha sido mezclada con aceite y las depositamos en un porta y le añadimos un par de gotas de la solución de Sudán III, tapamos con un cubre y calentamos

8. Tomamos unas gotas de la muestra que ha sido mezclada con harina, la depositamos en un portaobjetos y le añadimos unas gotas de solución de lugol y ponemos un cubre

9. Observamos al microscopio las tres preparaciones

Lectura y resultado

- La muestra que ha sido alterada con un harina, tendrá los granos de almidón con azul oscura
- La muestra que ha sido alterada con aceite, tendrá gotas de grasas de color amarillo-oro y de forma muy redonda