Práctica 8: Hemoglobina glicosilada total (HbA1c)

Hemoglobina glicosilada total 

Objetivo

El objetivo de la práctica es medir la HbA1c de sangre venosa 

Fundamento

NycoCard HbA1c es un test de diagnósttico in vitro para medir de una forma rápida la hemoglobina glicosilada en la sangre humana. Se recomienda medir el HbA1c como marcador de control metabólico a largo plazo en las personas con diabetes miellitus. 

Significado clínico

NycoCard HbA1c es un test de afinidad del boronato. El kit contiene varias placas de test compuestas por un filtro de membrana porosa, tubos de ensayos llenos de reactivo y una solución de lavado. 

Los reactivos contienen sustancias que rompen los eritocitos y producen una precipitación específica de la hemoglobina, luego un conjugado de ácido bórico acoplado a un colorante azul de fija a las configuraciones cis-diol de la hemoglobina glicosilada. Cuando se añade la sangre al ractivo, los eritrocitos sufren la lisis y la hemoglobina total precipita. 

Materiales

• Micropipetas de 5 y 25 microlitros

• Puntas de pipeta desechables

• Dispositivo del test 

Muesta 

• Sangre venosa anticoagulada con EDTA

Reactivos

• Tubo con reactivo del test

• Solución de lavado 

Aparataje

• NycoCard READER II

Procedimiento 

1. Homogeneizamos la muestra de sangre 
2. Calibramos el NycoCard reader con el blanco
3. Añadimos 5 microlitos de sangre al tubo de ensayo que contiene el reactivo
4. Mezclamos bien y esperamos entre 2 y 3 minutos (no podemos dejarlo menos de 2 minutos, ni superar los 3)
5. Depositamos 25 microlitos de esa mezcla sobre el dispositivo del test, manteniendo la micropipeta separada de la membrana. 
6. Esperamos 10 segundos
7. Añadimos 25 microlitros de la solución de lavado sobre la membrana y esperamos otros 10 segundos
8. Leemos el resultado dentro de los 5 minutos siguientes utilizando NycoCard Reader II. Utilizamos el lápiz, bajándolo hasta tocar la membrana y esperamos hasta obtener el resultado. 

Resultado

Nos da un 3% de HbA1c